[論文綜述:過去十年中HPLC的重要技術進展]:高效液相色譜技術最早應用于藥物領域,包括效能/純度/性能分析、藥物(代謝)動力學/生物分析測試、純化、高通量篩選(HTS)、過程控制(IPC)監測和質量控制(QC)測試。制藥行業是HPLC的主要應用市...
高效液相色譜技術最早應用于藥物領域,包括效能/純度/性能分析、藥物(代謝)動力學/生物分析測試、純化、高通量篩選(HTS)、過程控制(IPC)監測和質量控制(QC)測試。制藥行業是HPLC的主要應用市場,同時也是HPLC向更高通量和更優性能發展的主要驅動力。本文簡要回顧了過去十年影響藥物分析發展的HPLC的重大進展。討論的主題如下,部分項目體現在一個典型的時間軸上,如圖1所示。
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色譜柱:Sub-2μm,sub-3μm核殼和混合粒子;新穎的鍵合化學反應;親水作用色譜法(HILIC);多糖類手性固定相;生物分子和生物制藥柱子。
本文的目的是為繁忙的制藥科學家提供一個簡潔又全面的HPLC的重要的技術進展,每個主題都有實際使用過程中的便利和應用的簡短描述,從用戶的角度的評論,以及主要參考文獻(略)的支撐。
UHPLC的革命性創新始于1997年James Jorgenson教授在概念驗證方面的研究,緊接著第一個商業化系統于2004年推出。今天,從HPLC到UHPLC的轉化大部分都是由主要制造商完成,這些制造商目前都可以供應某種類型的UHPLC產品。UHPLC系統、柱子以及應用的詳細綜述在其他地方都可以看到。UHPLC在藥物分析領域的基本原理、優勢、潛在的問題和最佳應用都有充分的文件記錄。
表1概述了UHPLC的突出特點和優勢。注意,較高的系統壓力允許使用更小的微粒填充的柱子(如亞2μm)得到更快的分析速度(圖2)或復雜樣品更出色的分離(圖3)。由于使用改良的進樣器,內徑較小的管路系統(< 0.005英寸),更小的紫外檢測器流動池(0.5 - 2μL),所有的UHPLC都有比較低的系統擴散(4σ時,~10-20μL)。比較典型的應用是內徑為2.1–3.0mm的柱子,填充物為亞2μm或亞3μm顆粒。其他重要的系統特征包括更小的系統死體積(0.1-0.3 mL)和更快的檢測器響應/數據采集速率(>40 pt/s),以實現高通量的應用。